罗氏蛋白酶K

罗氏蛋白酶K说明：枯草蛋白酶类高活性蛋白酶，生物实验室常用酶之一。该酶在较广的pH范围内(pH4-12.5)均有活性。用于mRNA和DNA与蛋白质的分离。

CAS#：39450-01-6

外观：冻干粉

蛋白酶K，罗氏蛋白酶K特性：活性：>30U/mg

溶解性：用灭菌的50mmol/L Tris-Hcl(pH8.0)，1.5mmol/l乙

酸钙溶解，配制成浓度为20mg/ml的溶液。一般为了使用

方便，可用50%的溶解成10mg/ml,存放于-20℃

R：36/37/38-42 S：22-24-26-36/37

储存条件：-20℃

如果没有特别说明，此产品是不要用PBS去溶解，因为部分厂家产品含有钙，用PBS溶解时分产生沉淀。

蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。该酶有两个ca2 结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2 ，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2 的核酸酶的作用)。但是，如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白，如角蛋白一类，则可能需要使用含有1mmol/l ca2 而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2 。 　　蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族**酸和芳香族**酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。 　　推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

罗氏蛋白酶K产品链接：

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