PCR仪是一种检测和定量分析的新方法,可以作为传统实时定量PCR的替代方法,以实现一致定量及稀有等位基因的检测。数字PCR的工作原理在于将DNA或cDNA样品分割为许多单独、平行的PCR反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。单个分子可以被扩增一百万倍或更多。在扩增期间,TaqMan化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。当不存在任何靶标序列时,没有信号累积。PCR分析后,阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的一致计数,而无需标准品或内标。
PCR仪的维护:
1、PCR仪器需要定期检测,视制冷方式而定一般半年至少一次。
2、PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的,当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1~2℃时,可以运用温度修正和纠正PCR实际反应温度差。
3、PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制,要求越短越好,当PCR仪的降温过程超过60s,就应该检查仪器的制冷系统,对风冷制冷的PCR仪要较*地清理反应底座的灰尘;对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。
4、一般情况如能采用温度修正纠正仪器的温度时,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,B要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。
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