mRNA 转染是一种新的解决方案,适用于各种难以用质粒 DNA 转染的细胞,包括贴壁细胞(神经元或原代细胞)和悬浮细胞(淋巴细胞)。与 DNA 转染相比,该过程具有许多优点:转染细胞的百分比高,转染后蛋白质表达速度更快,与质粒或病毒载体相比,没有插入诱变的风险。实际上,mRNA 在细胞质中传递和表达,不需要穿过核膜,这是质粒转移的限制步骤之一。此外,新一代修饰的 mRNA 降低了通常由 mRNA 进入胞质溶胶诱导的毒性和免疫反应 (1, 2)。 mRNA 转染的瞬时特性对于许多应用来说是理想的,包括细胞重编程、基因组编辑 (CRISPR/Cas9) 和疫苗。 Polyplus-transfection? 开发了一种新型 mRNA 转染试剂 -jetMESSENGER?,其效率优于 DNA 转染效率。
适合众多应用:可用于基因表达,CRISPR基因编辑,iPS诱导和其他应用
接着我们来看看-jetMessenger在神经元转染上的具体应用
为了提高功能和生化分析等不同应用的转染效率,在不同类型的神经元和神经胶质细胞中转染了 eGFP mRNA。 如Fig8所示,获得了高于40% 的海马和皮质大鼠原代神经元的高转染率。 此外,从 iPS 细胞获得的多巴神经元实现了高转染效率,结果表明jetMESSENGER? 是研究重编程和分化的非常强大的工具。 对于人类正常的星形胶质细胞,获得了几乎 100% 的转染效率(Fig.8)。
磷酸化抑制剂
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