产品简介
PEG-8000慢病毒浓缩液为5×浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速地浓缩。该浓缩液操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,然后使用普通的离心机离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。
保存条件
常温配送。4 ºC保存,1年有效。
注意事项
1.本产品仅用于科学研究,不得用于临床诊断和治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1.收集慢病毒上清液,0.45 μm滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
Note:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2.将慢病毒上清与浓缩液按照4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份)4°C孵育过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下,进行3次。
Note:若时间不宽裕,可将孵育时间缩短为几小时。慢病毒颗粒在4 °C可以稳定保存数天。
3.于4°C,水平转子4000 g 离心25 min。
Note:角转子会将病毒离心到管壁上,仔细分辨管壁上的白色沉淀并将其冲洗下来。
4.小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
5.用初始体积(原上清液体积)1/10 - 1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
6.测定浓缩慢病毒样品的滴度,50 μL/管分装,于-80 °C冰箱保存。
Note:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。