一. 治疗前准备
（1）打开治疗室窗（门）通风；检查电源、氧气瓶及接口连接正确；
（2）开启氧气瓶开关，检查并确保无漏气；
（3）确认医用三氧治疗仪电源开关打开；
（4）检查用品：基本自血疗法专用包（臭氧反应袋、采血输血器、专用 50ml 注射器、无菌过滤器）、250ml 生理盐水一瓶、治疗车（止血带、消毒棉签和消毒液等输液用品）；
二、. 准备臭氧反应袋
（1）打开臭氧反应袋、采血输血器外包装，将所有夹子关闭，然后将输液管好长的一根连接无菌生理盐水瓶（100ml），好短的一根连接输血袋。
（2）连接好后，打开连接盐水瓶的夹子和针头处的夹子，用无菌生理盐水冲管路，冲管结束后，关闭连接盐水袋的夹子，打开连接输血袋的夹子，将输血袋内的抗凝剂挤出一半冲管路，以防止管路在采血回输过程中出现凝血；
三. 患者准备
（1）选取穿刺静脉，绑止血带，皮肤消毒、用专门配备的穿刺针静脉穿刺、固定。
（2）血袋位置低于抽血点，放置在治疗盘内，轻晃动反应袋使血液与抗凝剂混合，采集50ml或100ml血液 。
（3）松开止血带，停止采血，转换为生理盐水静脉滴注，保持静脉通道通畅。
四. 制取臭氧操作
（1）按下医用三氧治疗仪面板电源开关，根据语音提示进去浓度设定界面，按下数字设定所需浓度值，等侯显示屏上显示臭氧浓度达到要求浓度。
（2）在O3取其口安装无菌过滤器，准备专用50ml注射器，取下针头，抽动注射活塞，然后归位到刻度零位。
（3）注射器头小心垂直插入无菌过滤器口，按压取气按键直至使臭氧混合气体自动缓缓顶起注射活塞至 50ml刻度，然后停止按压取气按钮。
（4） 双手小心缓慢垂直上提起注射器脱离无菌过滤器口,安装针头，即刻倒转注射器,使注射器口向上。
五. 血液臭氧混合操作
（1）将反应袋注气口滤膜接口与臭氧注射器相连，打开臭氧灌注管夹子，使反应袋中注气管淹没于血中。
（2）缓慢注射完 50ml-100ml臭氧-氧气混合气体至反应袋中，可见众多微气泡形成，注射完毕后关闭臭氧灌注管夹子。
（3）然后轻轻摇晃血袋1-2分钟，使臭氧和血液充分的混合反应。
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