上海安谱HPLC色谱纯溶剂
高效液相色谱流动相的选择及注意事项如下:
1、流动相的性质要求。一个理想的流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低;而蛟弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。理论塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应从以下几个方面考虑∶@流动相不得改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色诺柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。②纯度。色诺柱的寿命与流动相有较大的关系，特别是其所含杂质在柱上有大量沉积的溶剂。③与检测圈匹配。使用紫外检测器时，所用流动相在检测波长下不得有吸收，或吸收很小。④粘度要低。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压增加，分离时间延长。好好选择沸点在100C以下的流动相。
2、流动相的pH值。采用反相色谱法分离弱酸或弱碱样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在;对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%酣酸溶液;分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
HPLC色谱纯溶剂
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